百日咳桿菌毒素IgG抗體檢測試劑盒
通用名稱:百日咳桿菌毒素IgG檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
英文名稱:Bordetella PT IgG ELISA
【產(chǎn)品規(guī)格】
96T
【預(yù)期用途】
試劑盒可用于人血清和血漿(檸檬酸鹽、肝素)中百日咳桿菌毒素IgG的定量檢測。
【檢測原理】
此固相百日咳桿菌毒素IgG抗體檢測試劑盒利用的是夾心法。微孔內(nèi)包被了抗原,用對人IgG有特異性的酶標(biāo)抗體來檢測樣品中的特異性抗體(此抗體可結(jié)合到包被抗原上)。底物反應(yīng)后,所顯示的顏色的強(qiáng)度與檢測到的IgG特異性抗體的量正比。樣品的結(jié)果可直接用標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得。
檢驗步驟
1) 加100µL標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品、已稀釋樣本至相應(yīng)孔中,A1為空白。
2) 封板后室溫(37℃)溫育60分鐘。
3) 移去封板紙,棄去孔中液體。300µL/孔洗滌液洗板3次,在吸水紙上拍干。(機(jī)洗為350µL/孔,5次)
4) 加入100µL/孔酶聯(lián)物,A1不加。
5) 封板后室溫(20℃-25℃)避光溫育30分鐘。
6) 重復(fù)步驟3
7) 加100µL/孔TMB底物液。
8) 室溫(20℃-25℃)避光溫育15分鐘。
9) 在每一微孔中加入100µLTMB終止液以終止底物反應(yīng)。輕輕搖動微孔板以使試劑混合均勻。此時,顏色藍(lán)色變成黃色。
10) 加100µL/孔終止液后,在30分鐘內(nèi)于450/620 nm處測OD值。
【結(jié)果計算】
為了使分析方法有效,必須滿足以下標(biāo)準(zhǔn):§
空白A1吸光度值<0.100§
標(biāo)準(zhǔn)品A吸光度值<0.200§
標(biāo)準(zhǔn)品B吸光度值>標(biāo)準(zhǔn)品A§
標(biāo)準(zhǔn)品C吸光度值>標(biāo)準(zhǔn)品B§
標(biāo)準(zhǔn)品D吸光度值>標(biāo)準(zhǔn)品C§
標(biāo)準(zhǔn)品E吸光度值>1.000§
低質(zhì)控結(jié)果IU/mL在標(biāo)簽范圍內(nèi)的§
高質(zhì)控結(jié)果IU/mL在標(biāo)簽上顯示的范圍內(nèi)
標(biāo)準(zhǔn)品A<標(biāo)準(zhǔn)品B<標(biāo)準(zhǔn)品C<標(biāo)準(zhǔn)品D<標(biāo)準(zhǔn)品E
如果不滿足這些標(biāo)準(zhǔn),則測試無效,必須重復(fù)
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