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通用名稱：抗精子抗體IBL試劑盒（酶聯(lián)診斷）
英文名稱：Spermatozoa-Ab ELISA
產(chǎn)品規(guī)格：96T
產(chǎn)品貨號：RE52001
產(chǎn)品品牌：德國IBL
注冊證號：國械注進20142405077

抗精子抗體試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

抗精子抗體IBL試劑盒（酶聯(lián)診斷）是科潤達生物公司提供的進口試劑盒，有注冊證，可用于臨床使用?？咕涌贵w試劑盒采用的是ELISA檢測方法，該方法檢測時間較短，操作起來簡單方便，無需特殊儀器，本產(chǎn)品的靈敏度高、特異性強，最多可同時檢測96人份，可更多的節(jié)約時間成本，此外公司還提供代測服務(wù)，并且提供完整的數(shù)據(jù)報告。抗精子抗體（AsAb）是一個復雜的病理產(chǎn)物，男女均可罹患。男性的精子、精漿，對女性來說皆屬特異性抗原，接觸到血液后，男女均可引起免疫反應(yīng)，產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，阻礙精子與卵子結(jié)合，而致生育方面的困擾。

預期用途：用于人血清中抗精子表面抗原自身抗體體外定性檢測?？捎糜谂R床使用。

背景簡介

在西方國家，不孕夫婦的比例占總?cè)巳旱?0~15%（Haas et al，1980）。目前人們還不能精確的知道由免疫學因素導致不孕的發(fā)病率是多少。由于有很多不同的檢測方法，人們對抗精子抗體在不孕中的作用存在著很大爭議。在檢測抗精子抗體的傳統(tǒng)檢測方法中，精子凝集檢測和精子固定檢測已被廣泛應(yīng)用。這些方法及其它凝集檢測都很耗費時間，并且結(jié)果與其操作不協(xié)調(diào)。與傳統(tǒng)的檢測方法相比，用ELISA檢測抗精子抗體具有很多優(yōu)點。IBL公司的抗精子抗體ELISA試劑盒結(jié)合這些優(yōu)點，并同時還具有高靈敏度和高特異性的特點。

檢測原理

抗精子抗體IBL試劑盒（酶聯(lián)診斷）利用的是非競爭性的原理。包被在微孔中的精子表面抗原是從池子中提取到的，它采用的方法是Alexander在1984年所提及到的那種方法。將疑似免疫學不孕病人的血清（已稀釋好）加入到包被孔中溫育，之后洗板，再加入過氧酶標記的抗人免疫球蛋白（IgA，IgG和IgM）并溫育。溫育后洗板，再加入TMB底物液，并酶標儀檢測所顯示的顏色強度。微孔中所顯示的顏色強度與結(jié)合的免疫球蛋白濃度成正比。實驗結(jié)果可從標準曲線上讀取，結(jié)果單位為units/ml。

試劑盒組成成分

儲存條件
抗精子抗體IBL試劑盒（酶聯(lián)診斷）應(yīng)當2~8℃的環(huán)境下運輸。微孔板條一但被拆開，應(yīng)當將其重新密封好。拆開了板條儲存于2~8℃的環(huán)境下時，其免疫活性可穩(wěn)定6周。

樣本要求

按照一般原則進行靜脈采血。不要使用明顯溶血、黃疸血和脂血樣品。采集的樣品存放于2~8℃的環(huán)境下時，必須在24小時內(nèi)將其檢測掉。如果想將血清存放更長時間，可以將血清凍存于-20℃的環(huán)境下，避免反復凍融。

用稀釋液將病人樣品按1：51的比例進行稀釋（例如：10μl樣品+500μl稀釋液），混合均勻。稀釋好的樣品于2~8℃下可保存24小時。

檢驗方法

實驗開始前將所需數(shù)目的板條和所有試劑都平衡到室溫。試劑盒可分3次進行檢測，下面所述體積可用來檢測4條包被板條（32個檢測孔）。如果實驗中需使用更多板條，則體積應(yīng)當相應(yīng)的進行改變。

洗滌液
將30ml濃縮的洗滌液中加入到600ml雙蒸水中。配置好的洗滌液在2-8℃的環(huán)境下可穩(wěn)定存放4周。冷藏時溶液會出現(xiàn)磷酸鹽沉淀物，室溫下又會溶解。

稀釋液
每支凍干的稀釋液中加入到20ml即用型的洗滌液中。配置好的稀釋液在2-8℃的環(huán)境下可穩(wěn)定存放2天，如果凍存于-20℃的環(huán)境下則可存放更長時間。標準品、質(zhì)控血清

檢測步驟
1、加100μl標準品、質(zhì)控品和樣本于相應(yīng)反應(yīng)孔中
2、封板后37℃溫育60分鐘。
3、每孔用250μl洗滌液洗板3次（建議您使用洗板機），吸水紙上拍干。
4、在每一微孔中加入100μl酶聯(lián)物。
5、封板后37℃溫育60分鐘。
6、每孔用250μl洗滌液洗板3次
7、在每一微孔加TMB底物液100μl。
8、室溫（18℃~24℃）溫育10-15分鐘。
9、每孔加100μl終止液以終止底物反應(yīng)，輕輕振板以使溶液混合均勻。
10、加終止液后30min內(nèi)在450nm讀取OD值。（參照波長：600~650nm）

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