HPL激素檢測(cè)試劑盒(ELISA法)
通用名稱:胎盤催乳素檢測(cè)試劑盒(ELISA法)
英文名稱:hPL ELISA
產(chǎn)品規(guī)格:96T
產(chǎn)品貨號(hào):EIA1283
產(chǎn)品品牌:德國(guó)DRG
注冊(cè)證號(hào):國(guó)械注進(jìn)20162401516
預(yù)期用途
HPL激素檢測(cè)試劑盒可用于人血清中胎盤催乳素的定量檢測(cè)??捎糜谂R床使用。
HPL前言簡(jiǎn)介
HPL的是生理學(xué)功能到目前為止還未確定,但它很大程度上與人生長(zhǎng)激素一樣是孕期胎兒胎盤和生理變化的調(diào)節(jié)者,這表明母體血清HPL的水平可以反映胎盤的功能。
在(胎兒)宮內(nèi)死亡、嬰兒分娩疼痛和生產(chǎn)時(shí)胎兒窒息的病例中,其人胎盤催乳素(HPL)水平會(huì)降低。如果HPL的低水平重復(fù)出現(xiàn),那么這種相關(guān)性就特別明顯,它表明子宮長(zhǎng)期處于這種狀態(tài)就會(huì)使胎兒受到損害。如果孕期正常,母體HPL水平降低(的情況)一般不會(huì)出現(xiàn)。在單胎妊娠中,如果HPL水平升高則意味著zui高的妊娠結(jié)果。然而高水平的HPL也有可能意味著嬰兒潛在某些特定疾病,如糖尿病嬰兒先天肥胖性巨體、新生兒溶血癥和胎兒水腫病的重要病理學(xué)原因。
HPL檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理
HPL檢測(cè)試劑盒是一種基于夾心法原理的固相酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)。微孔板上包被有能結(jié)合HPL分子上*抗原位點(diǎn)的單克隆抗體。一份含有內(nèi)源性HPL的病人樣本在包被孔中與酶聯(lián)物進(jìn)行溫育,該酶聯(lián)物是一種聯(lián)結(jié)有辣根過(guò)氧化物酶的抗HPL抗血清。溫育后,用洗滌液洗去未結(jié)合的酶聯(lián)物。辣根過(guò)氧化物酶的結(jié)合總量與樣本中HPL的濃度成正相關(guān)。加入底物溶液后,顯出的顏色強(qiáng)度與病人樣品中HPL的濃度成正比。
HPL檢測(cè)試劑盒組成成分
名稱 | 數(shù)量 | 成分 |
微孔板 | 12×8 | 包被有抗HPL的單克隆抗體 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 4×0.5ml | 即用型、濃度:1.25、5、10、20mg/L 轉(zhuǎn)換系數(shù):1mg/L=1mIU/L、含無(wú)汞防腐劑 |
高/低質(zhì)控品 | 2×0.5ml | 即用型、具體濃度見質(zhì)控單 |
酶聯(lián)物 | 1×11ml | 即用型 |
底物液 | 1×14ml | 即用型 |
終止液 | 1×14ml | 即用型、內(nèi)含0.5M的H2SO4 |
零標(biāo)準(zhǔn)品樣品稀釋液 | 1×90ml | 即用型 |
所需材料(未提供)
1、酶標(biāo)儀 (450±10nm)
2、移液器
3、吸水紙
4、蒸餾水或者去離子水
5、計(jì)時(shí)裝置
6、用于樣品稀釋的試管(12×75mm)
7、半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙或者數(shù)據(jù)處理軟件
儲(chǔ)存條件
HPL檢測(cè)試劑盒在2~8℃下儲(chǔ)存,在有效期內(nèi)可以保持活性。不要使用過(guò)期試劑。開封的試劑必須保存在2~8℃。微孔板必須在2~8℃下儲(chǔ)存。一旦包裝袋被打開,必須將它小心地嚴(yán)封起來(lái)。開封的試劑盒按上述條件保存,6周內(nèi)可保持活性。
樣本要求
1、樣品的采集:血清,靜脈穿刺采集全血,待其凝血,在室溫下用離心機(jī)分離血清。未*凝血前請(qǐng)勿離心,接受了抗凝劑治療的病人樣品可能需要更長(zhǎng)的凝血時(shí)間。
2、樣品的儲(chǔ)存:必須蓋住樣本并在實(shí)驗(yàn)之前于2~8℃下可儲(chǔ)存至5天。樣品需要更長(zhǎng)的儲(chǔ)存時(shí)間,必須在實(shí)驗(yàn)之前于-20℃下一次性凍存。融化的樣本在檢測(cè)之前必須要上下倒置幾次。
3、樣品的稀釋:實(shí)驗(yàn)開始前,必須用零標(biāo)準(zhǔn)品按1:100的比例稀釋樣品。首先在每一樣品試管中加入1ml零標(biāo)準(zhǔn)品,再向相應(yīng)的試管中加入10μL樣品,把所有的試管在旋渦混合器上混合10秒(避免氣泡)。
4、在*實(shí)驗(yàn)中,樣品中HPL濃度高于zui高標(biāo)準(zhǔn)品的必須用零標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行進(jìn)一步的稀釋并按實(shí)驗(yàn)步驟中再次重做實(shí)驗(yàn)。在計(jì)算樣品濃度時(shí)就應(yīng)當(dāng)把此稀釋因子考慮進(jìn)去。
HPL檢測(cè)試劑盒檢測(cè)步驟
1、將所需數(shù)量的板條固定到板架上。
2、將標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和已稀釋的樣品分別用新的一次性吸嘴取10μl加入到相應(yīng)的微孔中。
3、在每一微孔中加入100μl酶聯(lián)物。充分混勻10秒,在這個(gè)步驟*混勻很重要。
4、室溫溫育30分鐘。
5、倒出孔內(nèi)反應(yīng)物,每孔用300μl蒸餾水洗板5次,在吸水紙上拍干。注意:洗板步驟是否正確操作會(huì)明顯影響實(shí)驗(yàn)的靈敏度和精確度。
6、在每一微孔中加入100μl底物液。
7、室溫溫育10分鐘。
8、加50μl終止液到每個(gè)檢測(cè)孔中終止酶反應(yīng)。
9、加終止液后10分鐘之內(nèi),用酶標(biāo)儀在450±10nm處測(cè)定OD 值。
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