5羥色胺檢測試劑盒RE59141
通用名稱:5-羥色胺(5-HT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)(超敏)
英文名稱:(簡寫:5-HT)ELISA
產(chǎn)品貨號:RE59141
產(chǎn)品規(guī)格:96T
產(chǎn)品品牌:德國IBL
試劑盒預(yù)期用途
5羥色胺檢測試劑盒RE59141可用于低濃度及小體積樣本中五羥色胺的定量檢測。僅用于科研使用。
前言簡介
五羥色胺是色氨酸代謝的中間產(chǎn)物,它主要存在于腸嗜鉻細(xì)胞、血清素激活的神經(jīng)元和血小板中,它已被確定為是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一種神經(jīng)遞質(zhì)。可以在腸粘膜的嗜鉻細(xì)胞、血小板及腦血清素激活的神經(jīng)元中發(fā)現(xiàn)高濃度的五羥色胺。中樞血清素的神經(jīng)元可以影響生理功能,如睡眠和激素水平的調(diào)整。血清中五羥色胺水平的增高可見于惡性類癌、內(nèi)源性抑郁癥及精神分裂癥。
5羥色胺試劑盒檢測原理
將樣品分別與?;噭┮黄饻赜罂梢缘玫锦;奈辶u色胺。此實(shí)驗(yàn)采用的是競爭性ELISA的原理,?;奈辶u色胺與抗血清競爭性結(jié)合到一定數(shù)量的抗體結(jié)合位點(diǎn)上。當(dāng)反應(yīng)系統(tǒng)達(dá)到平衡后,洗板除去未結(jié)合抗原及抗血清復(fù)合物。結(jié)合在固相上的抗體被抗兔的過氧化物酶檢測到,在450nm處檢測底物液與過氧化物酶的反應(yīng)。結(jié)合到固相上的五羥色胺抗體的量與樣品中五羥色胺的濃度成反比。
儲(chǔ)存條件
5羥色胺試劑盒和運(yùn)輸環(huán)境和儲(chǔ)存環(huán)境溫度為2-8℃,避免熱源或太陽直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑的準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。打開了的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定,前提是要將試劑盒用袋子密封并儲(chǔ)存于2-8℃下。
試劑盒組成成分
數(shù)量 | 標(biāo)記 | 成分 |
1×12×8 | MTP | 包被板,可拆,微孔中包被五羥色胺 |
1×4ml | CAL CONC | 標(biāo)準(zhǔn)品濃縮型,濃度500ng/mL |
1×2×4ml | CONTROL 1+2 | 質(zhì)控品1+2,濃縮型(500×)濃度及范圍詳見質(zhì)控單。 |
1×4ml | ACYL BUF LOY | 酰化液,凍干粉 |
1×1ml | ACYL BUF LOY CONC | ?;海瑵饪s型,黃色。 |
4×2.5ml | ACYLREAG LYO | ?;噭?,凍干粉 |
1×3ml | DEAC | 鈍化劑,即用,藍(lán)色 |
1×12ml | ENZCONJ | 酶聯(lián)物,即用。 |
1×20ml | WASHBUF CONC | 洗滌液,25倍濃縮 |
1×12ml | TMB SUBS | 底物液,即用 |
1×12ml | TMB STOP | 終止液,即用,內(nèi)含0.3M硫酸 |
2×6ml | SOLVENT | SOLVENT 溶劑。即用。 |
1×2ml | ASC ACID | 抗壞血酸即用。內(nèi)含10%抗壞血酸 |
1×50ml | ASSAYBUF | 檢測緩沖液使用前需加入抗壞血酸。內(nèi)含10mM PBS (0.9% NaCl),穩(wěn)定劑。 |
實(shí)驗(yàn)所需器材但試劑盒不提供
●移液器,體積:10;20;25;50;100;200μl
●用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋的聚丙烯(PP)試管或聚丙烯(PP)微量試管
●試管架
●軌道搖床(500rpm)
●旋渦混合器
●帶儲(chǔ)器的8道移液器
●洗滌瓶,自動(dòng)或半自動(dòng)洗板機(jī)
●可在450nm處讀數(shù)的酶標(biāo)儀(參考波長:570-650nm)
●雙蒸水或去離子水
●吸水紙、取樣吸頭和計(jì)時(shí)器
5-HT試劑盒檢測步驟
1 | 將?;臉?biāo)準(zhǔn)品、?;馁|(zhì)控品和酰化的樣品各50μl加入到相應(yīng)的微孔中。 |
2 | 粘合鋁箔覆蓋微孔板,在2-8℃孵育15-10小時(shí)(過夜) |
3 | 移取粘合鋁箔,棄去孵育液,每孔用250ul稀釋的洗滌液洗滌微孔板4次,在紙巾上拍干除去殘余液體。 |
4 | 在每一微孔中加入100μl酶聯(lián)物。 |
5 | 蓋板,室溫(18-25℃)下?lián)u床振蕩(500rpm)溫育60min。 |
6 | 移去粘合鋁箔,棄去孵育液,每孔用250ul稀釋的洗滌液洗滌微孔板4次,在紙巾上拍干除去殘余液體。 |
10 | 在每一微孔中加入100μlTMB底物液。 |
11 | 室溫(18-25℃)下?lián)u床振蕩(500rpm)溫育20-30min。 |
12 | 在每一微孔中加入100μl終止液以終止底物反應(yīng),輕輕振板以使溶液混合均勻。 |
13 | 加終止液后15min內(nèi)450nm(參考波長570-650nm)處讀取OD值。 |
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