此產(chǎn)品是科研用途,不屬于醫(yī)療器械
唾液可的松|皮質(zhì)醇試劑盒
唾液檢測(cè)簡(jiǎn)介
唾液是一種復(fù)雜的混合物,不僅含有各種蛋白質(zhì),還含有 DNA、RNA、脂肪酸以及各種微生物等。研究發(fā)現(xiàn),血液中的各種蛋白質(zhì)成分同樣存在于唾液中,唾液能反映出血液中各種蛋白質(zhì)水平的變化。因此,就有可能通過(guò)唾液的檢測(cè)來(lái)進(jìn)行疾病的診斷。
隨著社會(huì)的進(jìn)步,生活水平的不斷提高,人們對(duì)醫(yī)學(xué)檢查的要求也越來(lái)越高,要求無(wú)創(chuàng)、簡(jiǎn)便的檢查診斷方法。因而唾液標(biāo)本受到廣大研究者的普遍關(guān)注。與血清標(biāo)本相比,唾液采集安全方便,無(wú)創(chuàng)傷,無(wú)血源性疾病傳播的危險(xiǎn),患者無(wú)痛苦,易于接受。
唾液可的松檢測(cè)項(xiàng)目
通用名稱(chēng): (酶聯(lián)免疫法)
英文名稱(chēng):Salivary Cortisol ELISA
規(guī)格:96T
型號(hào):slv2930
預(yù)期用途: 唾液可的松|皮質(zhì)醇激素類(lèi)檢測(cè)試劑盒 此試劑盒用于唾液中活性游離可的松的定量檢測(cè)。
【唾液皮質(zhì)醇項(xiàng)目簡(jiǎn)介】
皮質(zhì)醇在人體機(jī)能中有著很重要的作用。皮質(zhì)醇的水平與壓力存在著很大的相關(guān)性。皮質(zhì)醇是一種由腎上腺分泌的類(lèi)固醇荷爾蒙激素。它在機(jī)體中的功能包括血壓的調(diào)節(jié)、心血管功能及調(diào)節(jié)人體的蛋白質(zhì)、碳水化合物和脂肪都扮演著重要角色。機(jī)體通過(guò)皮質(zhì)醇分泌量的增加以應(yīng)答身體上任何壓力,無(wú)論是物理上的(如疾病、創(chuàng)傷、手術(shù)或溫度)還是心理上的。皮質(zhì)醇的分泌會(huì)引起肌肉蛋白質(zhì)的分解,使釋放出的氨基酸進(jìn)入血液中這些氨基酸被運(yùn)送到肝臟中合成葡萄糖以提供能量。這個(gè)過(guò)程被稱(chēng)之為糖異生。這一過(guò)程提高了血糖水平,所以大腦將會(huì)有更多的葡萄糖提供能量。同樣,皮質(zhì)醇也會(huì)導(dǎo)致脂肪酸的釋放,一種來(lái)源于脂肪細(xì)胞的能量以提供肌肉使用。
皮質(zhì)醇水平升高和缺乏的晝夜變化已確認(rèn)與庫(kù)欣綜合征(促腎上腺皮質(zhì)激素分泌過(guò)多)有關(guān)。循環(huán)皮質(zhì)醇水平的身高也在患有腎上腺瘤的病人身上被確認(rèn)。低水平的皮質(zhì)醇在原發(fā)性腎上腺功能不全(例如:腎上腺發(fā)育不全、阿狄森氏?。┖痛倌I上腺皮質(zhì)激素缺乏上被確認(rèn)。由于皮質(zhì)醇水平是隨著晝夜變化的,所以正常和異常的皮質(zhì)醇水平是很難區(qū)分的。因此建議連續(xù)收集幾日的樣本進(jìn)行檢測(cè)。唾液因其是血液的一種自然超濾液而成為檢測(cè)類(lèi)固醇的一個(gè)很好的介質(zhì)。
【唾液皮質(zhì)醇檢測(cè)原理】
該唾液可的松|皮質(zhì)醇激素類(lèi)檢測(cè)試劑盒是基于競(jìng)爭(zhēng)法的酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒。微孔板中包被有單克隆抗體,樣品中的可的松與HRP標(biāo)記的可的松競(jìng)爭(zhēng)。洗板后,加入底物液溫育,之后再加入終止液。所結(jié)合的酶聯(lián)物的量與樣品中的可的松濃度成反比。
【唾液皮質(zhì)醇試劑盒組成成分】
1、微孔板——12×8——包被有可的松抗血清
2、標(biāo)準(zhǔn)品(SD 0-6)——7×1ml——濃度0 - 0.1 - 0.5 - 1.5 – 4 – 10 - 30 ng/mL
3、高/低質(zhì)控品——2×1ml——即用型、具體濃度見(jiàn)質(zhì)控單
4、酶聯(lián)物——1×26ml——即用型 含HRP標(biāo)記的可的松
5、底物液——1×25ml——即用型 含TMB
6、終止液——1×14ml——即用型 含0.5M 硫酸
7、洗滌液(40×)——1×30ml
所需材料(未提供)
酶標(biāo)儀
移液器
吸水紙
蒸餾水
計(jì)時(shí)裝置
試管
坐標(biāo)紙或自動(dòng)計(jì)算軟件
【儲(chǔ)存條件】
未開(kāi)封的試劑盒保存在2~8℃下,效期內(nèi)有效。不要使用過(guò)期試劑。開(kāi)啟過(guò)的試劑需保存在2~8℃下,微孔板必須儲(chǔ)存在2~8℃,一旦撕開(kāi),需小心密封好。
【樣品要求】
樣本采集
采集樣本前的30分鐘內(nèi),應(yīng)避免進(jìn)食、飲水、嚼口香糖以及刷牙。推薦在采樣前5分鐘,使用冷水沖洗口腔一次。當(dāng)病人有口腔疾病、發(fā)炎或口腔受到損害(血液污染)時(shí),請(qǐng)勿采樣。(含Sodium azide的樣本不能用于檢測(cè))推薦在飯前的2~3個(gè)小時(shí)內(nèi)采集5份樣本。
樣品保存
2~8℃下一周有效、要保存更長(zhǎng)時(shí)間需儲(chǔ)存在-20℃、反復(fù)凍融不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響。每個(gè)樣本必須被凍結(jié)、解凍和離心至少一次以除去黏蛋白。所采集的樣本必須在深低溫下保存至少一夜,然后室溫下溶解,離心5~10分鐘(2000~3000g)。所得上清液可用于實(shí)驗(yàn)檢測(cè)。將5份處理過(guò)的樣本混合。
樣品稀釋
樣本濃度高于高標(biāo)準(zhǔn)品,則使用標(biāo)準(zhǔn)品0對(duì)樣本進(jìn)行稀釋。
結(jié)果需乘以稀釋因子
推薦稀釋比
a)1:10 10μl樣品+90μl標(biāo)準(zhǔn)品0
【唾液皮質(zhì)醇檢測(cè)方法】
30ml+1170ml蒸餾水,混勻
室溫下2周穩(wěn)定
檢測(cè)開(kāi)始前將試劑盒所有組分穩(wěn)定至室溫
檢測(cè)步驟
1、標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品、樣品各100μl到相應(yīng)的孔中。
2、每孔加20μl酶聯(lián)物,混勻10秒鐘。
3、室溫下溫育60分鐘(建議該過(guò)程在300rpm的搖床上進(jìn)行)。
4、倒出孔內(nèi)液體,每孔400μl洗滌液洗板5次。
5、加入20μl底物液。
6、室溫下溫育30分鐘。
7、每孔加入100μl終止液。
8、加入終止液后,10分鐘內(nèi)450nm下讀取吸光值。
【唾液皮質(zhì)醇結(jié)果計(jì)算】
1.標(biāo)準(zhǔn)品的濃度設(shè)為X軸,吸光值為Y軸,在坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。樣品的濃度可以直接在標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出
2.自動(dòng)計(jì)算:采用四參數(shù)邏輯函數(shù)的進(jìn)行計(jì)算
標(biāo)準(zhǔn)示例
標(biāo)準(zhǔn)品 (ng/ml) | 吸光值 |
標(biāo)準(zhǔn)品0(0 ng/ml) | 2.00 |
標(biāo)準(zhǔn)品1(0.1 ng/ml) | 1.89 |
標(biāo)準(zhǔn)品2(0.5ng/ml) | 1.62 |
標(biāo)準(zhǔn)品3(1.5 ng/ml) | 1.22 |
標(biāo)準(zhǔn)品4(4.0 ng/ml) | 0.75 |
標(biāo)準(zhǔn)品5(10 ng/ml) | 0.40 |
標(biāo)準(zhǔn)品6(30 ng/ml) | 0.18 |
唾液皮質(zhì)醇檢測(cè)項(xiàng)目
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