褪黑激素科研試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
通用名稱(chēng):褪黑激素檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
英文名稱(chēng):Melatonin ELISA
產(chǎn)品規(guī)格:96T
預(yù)期用途:
褪黑激素科研試劑盒可用于人血清和血漿中褪黑激素的體外定量檢測(cè)。僅用于科研使用。
檢測(cè)原理:
利用的是競(jìng)爭(zhēng)法的原理。生物素和非生物素標(biāo)記的抗原競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合包被板上有限的抗體結(jié)合位點(diǎn)。生物素抗原結(jié)合到抗體上的量與樣品中抗原的量成反比。系統(tǒng)達(dá)到平衡后,洗板除去游離的生物素抗原,結(jié)合到抗體上的生物素抗原可以用抗生物素堿性磷酸酶標(biāo)記物和對(duì)硝基苯磷酸底物檢測(cè)出來(lái)。用已知的標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)據(jù)做一條標(biāo)準(zhǔn)曲線,將未知樣品的酶活性與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較就可以定量出未知樣品的量。
組成成分:
數(shù)量 | 標(biāo)記 | 成分 |
1×12×8 | MTP | 微孔板,微孔中包被了抗兔IgG(羊,多克?。?/p> |
3×2ml | BIOTIN LYO | 褪黑激素生物素,凍干,內(nèi)含穩(wěn)定劑。 |
3×2ml | ANTISERUM LYO | 褪黑激素抗血清,凍干粉,內(nèi)含抗血清(兔,多克?。┖头€(wěn)定劑。 |
1×250ul | ENZCONJ CONC | 酶聯(lián)物,80倍濃縮,內(nèi)含堿性磷酸酶標(biāo)記的抗生物素抗體(羊)、Tris緩沖液和穩(wěn)定劑。 |
1×6×2ml | CAL A-F LYO | 標(biāo)準(zhǔn)品A-F,凍干粉,內(nèi)含穩(wěn)定劑,提取濃度請(qǐng)見(jiàn)試劑瓶標(biāo)簽或QC質(zhì)控品。 |
1×2×2ml | CONTROL 1+2 LYO | 質(zhì)控品1+2,凍干粉,內(nèi)含穩(wěn)定劑,濃度/可接受范圍請(qǐng)見(jiàn)試劑瓶標(biāo)簽。 |
1×100ml | WASHBUF CONC | 洗滌液,10倍濃縮,內(nèi)含磷酸緩沖液 |
32×13ml | PNPP SUBS | PNPP 即用 |
1×15ml | PNPP STOP | PNPP終止液,即用,內(nèi)含1M的NaOH和0.25M的EDTA。 |
2×10 | EXTRCOL | 提取柱,即用,C18 RP,1cm3/100mg。另需提取柱可從IBL定購(gòu)(編號(hào):KEME761) |
3× | FOIL | 封板紙 |
所需材料(未提供)
1)移液器,體積:50; 500ul
2)試管(12×75mm)
3)軌道振蕩器(400-600rpm)
4)旋渦混合器
5)帶儲(chǔ)器的8道移液器
6)洗滌瓶,自動(dòng)或半自動(dòng)洗板機(jī)
7)離心機(jī)(冷凍離心機(jī)更適宜):100-200×g,也可選用多頭抽真空裝置(例如:Mallinekrodt-Baker 或Waters)。
8)甲醇(HPLC級(jí))
9)蒸發(fā)離心機(jī)
10)可在405nm處讀數(shù)的酶標(biāo)儀(參考波長(zhǎng)600-650nm)
11)蒸餾水或去離子水
12)吸水紙、取樣吸頭和計(jì)時(shí)器
儲(chǔ)存條件:
必須在2-8℃的環(huán)境下運(yùn)輸和儲(chǔ)存,避免太陽(yáng)直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述,如果將包被板密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下時(shí),試劑在有效期內(nèi)穩(wěn)定。用甲醇洗提后的提取柱可用于其它樣品的提取或儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下。提取柱可重復(fù)使用4次。
樣本要求:
血清,血漿(EDTA,肝素)
按照靜脈穿刺的常規(guī)注意事項(xiàng)采集樣品,血液樣品自采集到實(shí)驗(yàn)時(shí)都必須保證其化學(xué)完整性。不要使用明顯溶血、黃疸和脂血樣品?;鞚岬臉悠窇?yīng)當(dāng)在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前離心以除去所有的顆粒性物質(zhì)。 | ||||
儲(chǔ)存 | 2-8℃ | ≤-20℃ | ≤-70℃ | 避免太陽(yáng)直射,避免反復(fù)凍融。 |
穩(wěn)定性 | 24小時(shí) | 3個(gè)月 | 1年 |
檢測(cè)方法:
注意 | 用于96人份檢測(cè)色試劑盒成分可分成3次進(jìn)行。下列所述體積為檢測(cè)32人份時(shí)所需要的量。 |
凍干或濃縮成分的準(zhǔn)備:
稀釋/溶解 | 成分 | 稀釋劑 | 比例 | 備注 | 儲(chǔ)存 | 穩(wěn)定性 | |
15ml | 洗滌液 | 150ml | 雙蒸水 | 1:10 | 2-8℃ | 8周 | |
標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品 | 2.0ml | 雙蒸水 | 靜置15min,混合時(shí)避免氣泡 | ≤-20℃ | 直至有效期 | ||
褪黑激素生物素 | 2.0ml | 已稀釋的洗滌液 | 靜置15min,混合時(shí)避免氣泡 | 臨時(shí)配置,只能使用一次 | |||
褪黑激素抗血清 | 2.0ml | 蒸餾水 | 靜置15min,混合時(shí)避免氣泡 | ||||
70ul | 酶聯(lián)物 | 5.6ml | 已稀釋的洗滌液 | 1:81 | |||
10ml | 未稀釋甲醇 | 100ml | 蒸餾水 | 10%(v/v) |
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