犬IL-10檢測試劑盒(ELISA)
犬IL-10檢測試劑盒產(chǎn)品詳細
中文名稱 | 犬IL-10檢測試劑盒(ELISA法) |
英文名稱 | RayBio® Canine IL-10 ELISA Kit |
產(chǎn)品貨號 | ELH-IL-10 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 96T |
檢測樣本 | 血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液 |
適應物種 | 犬 |
預期用途 | 定量測定犬血清、血漿和細胞培養(yǎng)上清液中的IL-10的含量 |
產(chǎn)品品牌 | 美國RayBio |
供應商家 | 深圳市科潤達生物工程有限公司 |
犬IL-10試劑盒預期用途
RayBio®犬IL-10細胞因子elisa試劑盒采用體外酶聯(lián)免疫吸附測定法,定量測定犬血清(犬IL-10濃度在正常血清/血漿中較低,并且在該測定中可能檢測不到)血漿和細胞培養(yǎng)上清液中的IL-10的含量。
犬IL-10檢測試劑盒檢測原理
犬IL-10細胞因子酶聯(lián)試劑盒使用包被有犬IL-10特異性抗體的96孔酶標板,標準品和樣品被加入到孔中,樣品中存在的IL-10通過固相的抗體與孔結(jié)合。洗滌后加入生物素化的抗犬IL-10抗體。 洗去未結(jié)合的生物素化抗體后,將HRP-標記的鏈霉素加入到到孔中。 再次洗滌板孔,向孔中加入TMB底物溶液,底物顯色與所結(jié)合的IL-10量成比例。 加入終止液顏色從藍色變?yōu)辄S色,并且在450nm處測量顏色的吸光度值。
犬IL-10檢測試劑盒組成成分
組分 | 表述 | 儲存/預準備后穩(wěn)定性 |
IL-10酶標板(項目A) | 12*8=96孔,包被有抗小鼠IL-10抗體 | 4℃ 1個月 |
濃縮洗滌液(20x)(項目B) | 20x濃縮溶液 25ml | 4℃ 1個月 |
標準蛋白(項目C) | 2瓶小鼠IL-10。1個小瓶就夠配制每個一式兩份的標準品。 | -80℃1周 |
檢測抗體IL-10(項目F) | 2瓶生物素化的抗小鼠IL-10。 每個小瓶足以測定微板的一半。 | 4℃ 5天 |
濃縮HRP-鏈霉親和素(項目G) | 200μl 350X濃縮HRP綴合鏈霉親和素 | 不能保存和重新使用 |
一步法TMB底物(項目H) | TMB溶液12ml | N/A |
終止液(項目I) | 8ml 0.2M硫酸 | N/A |
測定稀釋劑D(項目K) | 15ml 5X濃縮液 | 4℃ 1個月 |
測定稀釋劑B(項目E) | 15ml 5X濃縮液 | 4℃ 1個月 |
將未使用的板條重新裝回到含有干燥劑包的袋中,沿著整個邊緣重新密封。 |
試劑盒存儲條件
犬IL-10細胞因子elisa試劑盒可在-20°C下保存,從裝運之日起存放可長達1年。 避免反復凍融循環(huán)。 試劑盒可以在4℃下儲存長達6個月。 對于更長時間儲存時,建議儲存在-80°C。 該試劑盒組分見下表。
犬IL-10檢測試劑盒檢測步驟
1.使用前將所有試劑和樣品置于室溫(18 - 25oC)。建議所有標準和樣品至少重復一次。
2.根據(jù)您的實驗標記可拆卸的8孔條。
3.分別加入樣品和每個標準品100μl(參見試劑制備步驟3)到適當?shù)陌蹇字小Iw上蓋子,室溫溫和振蕩孵育2.5小時
4.棄去溶液,用1X洗滌液洗滌4次。使用多通道移液器或自動洗板機洗板,每孔加入洗滌緩沖液(300μl)。每個步驟中去除液體對于良好的性能是至關重要的。洗完后,通過吸取或傾析清除任何剩余的洗滌緩沖液。倒置板并用干凈的吸水紙吸干印跡。
5.每孔加入100μl1X制備的生物素化抗體(試劑制備步驟6)。在室溫下溫和振蕩孵育1小時。
6.棄去溶液。重復洗滌,如步驟4。
7.加入100μl制備的鏈霉親和素溶液(見試劑制備步驟7)。在室溫下溫和搖動孵育45分鐘。
8. 棄去溶液。 重復洗滌,如步驟4。
9.向每個孔中加入100μlTMB一步底物試劑(項目H)。在室溫下在黑暗中輕輕振蕩孵育30分鐘。
10.向每個孔中加入50μl終止液(項目I)。 立即讀取450 nm處吸光度值。
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