人可溶性α–klotho蛋白酶免試驗(yàn)
人可溶性α–klotho蛋白試劑盒產(chǎn)品詳細(xì)
中文名稱 | 人可溶性α–klotho蛋白試劑盒 |
英文名稱 | Human soluble alpha-klotho protein kit |
產(chǎn)品貨號(hào) | 27998 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 96T |
檢測(cè)樣本 | 血清、血漿、尿液 |
適應(yīng)物種 | 人 |
預(yù)期用途 | 可用于血清,血漿和尿液中人可溶性α–klotho的定量檢測(cè) |
產(chǎn)品品牌 | 日本IBL |
供應(yīng)商家 | 深圳市科潤達(dá)生物工程有限公司 |
試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
人可溶性α–klotho蛋白檢測(cè)試劑盒根據(jù)酶免法的夾心原理,利用兩種不同的高特異性抗體,TMB作為著色劑,顏色強(qiáng)度與人可溶性α–klotho的量成正比
試劑盒檢測(cè)范圍
93.75~6000pg/mL
試劑盒預(yù)期用途
人可溶性α–klotho蛋白檢測(cè)試劑盒可用于血清,血漿和尿液中人可溶性α–klotho的定量檢測(cè)。
人可溶性α–klotho蛋白試劑盒組成
名稱 | 數(shù)量 | 成分 |
包被板 | 96孔 | 包被有抗人可溶性α–klotho(67G3)小鼠IgG單抗,親和純化 |
標(biāo)記抗體濃縮30X | 0.4mlx1 | HRP標(biāo)記的抗人可溶性α–klotho小鼠IgG Fab’,親和純化 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.5mlx2 | 重組人可溶性α–klotho |
EIA緩沖液 | 30mlx1 | |
標(biāo)記抗體稀釋液 | 12mlx1 | 1%BSA,含0.05%吐溫20的PBS |
著色劑 | 15mlx1 | TMB底物液 |
終止液 | 12mlx1 | 1N硫酸 |
洗滌緩沖濃縮液 40X | 50mlx1 | 含0.05%吐溫20的磷酸緩沖液 |
人可溶性α–klotho蛋白檢測(cè)實(shí)驗(yàn)所需材料但試劑盒未提供
■酶標(biāo)儀(450nm)
■移液器和槍頭
■燒杯
■蒸餾水
■孵箱(37±1℃)
■坐標(biāo)紙(對(duì)數(shù)-對(duì)數(shù))
■吸水紙
■標(biāo)準(zhǔn)品稀釋管
■洗瓶
■一次性試驗(yàn)管
人可溶性α–klotho蛋白試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟
使用前,所有樣品應(yīng)平衡至室溫,大約30min,然后充分混勻,確保試劑質(zhì)量無變化,標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣品檢測(cè)同時(shí)進(jìn)行
試劑 | 檢測(cè)樣品 | 標(biāo)準(zhǔn)品 | 檢測(cè)樣品對(duì)照孔 | 試劑對(duì)照孔 |
檢測(cè)樣品100ul | 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品(1-7管)100ul | EIA緩沖液(第8管) 100ul | EIA緩沖液100ul | |
蓋板,室溫下溫育60min | ||||
洗板4次 | ||||
酶標(biāo)抗體 | 100ul | 100ul | 100ul | - |
蓋板,室溫下溫育30min | ||||
洗板4次 | ||||
顯色劑 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul |
室溫避光溫育30min | ||||
終止液 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul |
加終止液后30min內(nèi)450nm處讀取OD值 |
1.確定好空白對(duì)照孔,并在相應(yīng)的微孔中加入100ul EIA緩沖液。
2.確定好樣品對(duì)照孔,檢測(cè)樣品孔和標(biāo)準(zhǔn)品孔,然后分別將100ul樣品對(duì)照品、檢測(cè)樣品和稀釋好的標(biāo)準(zhǔn)品加入到相應(yīng)的微孔中。
3.蓋板,室溫下溫育60min
4.在微孔中加入350ul以上的洗滌液,浸泡15-30秒,棄去洗滌液。重復(fù)4次,后在吸水紙上拍干;
5.每孔加100ul酶標(biāo)抗體,除試劑空白對(duì)照孔外
6.蓋板,室溫下溫育30min
7.按照步驟4)洗板5次
8.將所需量的顯色劑加入到試管中,然后在每一微孔中加入100ul顯色劑。為了避免污染,請(qǐng)勿將剩余試劑在倒入原裝試劑瓶中。
9.室溫避光溫育30min,加入顯色劑后溶液顏色會(huì)變成藍(lán)色
10.在每孔加100ul終止液,此時(shí)溶液顏色會(huì)變成黃色
11.擦去微孔板底部的污點(diǎn)或水滴,終止液加入后30min內(nèi),在酶標(biāo)儀450nm處讀數(shù)
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