人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒(ELISA)
檢測試劑盒產(chǎn)品詳細
中文名稱 | 人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒 ELISA |
英文名稱 | Human Phospho Tau(181P) Assay Kit ELISA |
產(chǎn)品貨號 | 27812 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 96T |
檢測樣本 | 人腦脊液 |
適應物種 | 人 |
預期用途 | 用于檢測人腦脊液里磷酸化Tau蛋白定性檢測。 |
產(chǎn)品品牌 | 日本IBL |
供應商家 | 深圳市科潤達生物工程有限公司 |
elisa試劑盒預期用途
人磷酸化Tau蛋白elisa試劑盒(老年癡呆)用于檢測人腦脊液里磷酸化Tau蛋白定性檢測,僅供科研用,不用于臨床診斷。
試劑盒成分
96T x 1 | 預包被板 |
0.4mL x 1 | 酶標記抗體: (30倍濃縮)HRP標記抗人Tau p181-RK27A6 小鼠IgG Fab’) |
0.5mL x 2 | 標準品:重組人Tau441 |
30mL x 1 | EIA緩沖液 |
12mL x 1 | 標記抗體稀釋液 |
15mL x 1 | 顯色劑 |
12mL x 1 | 終止液 |
50mL x 1 | 濃縮洗滌液 |
檢測試劑盒檢測原理
人磷酸化Tau蛋白elisa試劑盒(老年癡呆)是固相夾心ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)。當將*抗體包被在平板上時,將樣品和標準品加入到板孔中進行*次反應。 反應后,加入HRP-綴合的二抗進入板孔進行第二次反應。 沖洗掉未結(jié)合的二抗后,將四甲基聯(lián)本胺(TMB)加入孔中并顯色。
Tau蛋白檢測實驗所需器材(但試劑盒沒有提供)
★ | 酶標儀 |
★ | 微移液管及其槍頭 |
★ | 量筒及燒杯 |
★ | 去離子水 |
★ | 冰箱(4°C) |
★ | 坐標紙(log/log) |
★ | 吸水紙 |
★ | 試管(用于標準品稀釋) |
★ | 洗瓶 (用于洗板) |
★ | 孵育器(37±1℃) |
★ | 一次性試劑管(用于濃縮酶標記抗體和顯色劑) |
試劑盒儲存條件
人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒在2-8℃保存,有效期見試劑盒外包裝。
檢測試劑盒實驗步驟
使用前,將所有試劑應平衡至室溫,大約30min,充分混勻,確保試劑質(zhì)量無改變,標準曲線和樣品檢測必須同時進行.
1.確定樣本空白孔,并加入100ulEIA緩沖液。
2.確定樣本孔和標準品孔,樣本和標準品(管1-7)100ul分別加入相應的孔中
3.蓋板,*次孵育,
4.洗板,按照前述“操作注意事項"中第8-9條進行。使用稀釋好的洗滌液,后在吸水紙上*拍干。
5.將每孔中加入100ul 準備好的標記抗體
6.蓋板,第二次孵育
7.洗板,按照前述“操作注意事項"中第8-9條進行。使用稀釋好的洗滌液,后在吸水紙上*拍干。
8.取需要量的底物液到一次性檢測管中,每孔加入100ulTMB溶液。為了避免污染,檢測管中剩余的底物液不得再次放回原底物液瓶中。
9.黑暗中室溫孵育30min,顏色變藍。
10.每孔加入100ul 終止液終止反應,通過點擊板的一面來混合板內(nèi)溶液,此時顏色變?yōu)辄S色。
11.讀取OD值:將板底污物清除,并保證板孔內(nèi)無氣泡,以空白孔為對照進行標準品和樣本的測量。測量在450nm處進行,參考波長600-650nm,測量應在終止液加入后30min內(nèi)進行。
試劑盒檢測步驟表格如下
試劑 | 待檢測樣品 | 標準品 | 樣品空白 |
檢測樣品100ul | 稀釋標準品(1-7管)100ul | EIA緩沖液 | |
蓋板,2-8°C下溫育過夜 | |||
洗板4次(每孔加洗滌液不少于350ul,按操作注意事項中的8和9條進行 | |||
酶標抗體 | 100ul | 100ul | 100ul |
蓋板,2-8°C下溫育30min | |||
洗板5次(每孔加洗滌液不少于350ul,按操作注意事項中的8和9條進行 | |||
底物液 | 100ul | 100ul | 100ul |
室溫避光溫育30min | |||
終止液 | 100ul | 100ul | 100ul |
加終止液后,30min內(nèi)于450nm/600-650nm處讀取OD值, |
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