降鈣素試劑盒(酶聯(lián)免疫檢測(cè)法)
ELISA方法操作孵育過程常見問題及解答
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。
3)孵育溫度未按照說明書要求進(jìn)行,溫度過高或過低;
解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間和孵育溫度。
通用名稱:降鈣素試劑盒(酶免法)
英文名稱:Calcitonin ELISA
產(chǎn)品貨號(hào):NM59011
產(chǎn)品規(guī)格:96T
檢測(cè)樣本:血清
公司品牌:德國(guó)IBL
儲(chǔ)存條件:2-8℃
檢測(cè)方法:ELISA方法
預(yù)期用途:可用于人血清中降鈣素的定量檢測(cè)
參考價(jià)格:詢價(jià)
供應(yīng)商家:深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司
預(yù)期用途
此降鈣素檢測(cè)試劑盒可用于人血清中降鈣素的定量檢測(cè)。
檢測(cè)原理
此試劑盒采用雙位點(diǎn)酶免法檢測(cè)降鈣素完整的32氨基酸鏈。利用兩種不同的人降鈣素小鼠單抗,生物素標(biāo)記的抗體結(jié)合降鈣素11-23的氨基酸,另外一個(gè)HRP標(biāo)記的抗體結(jié)合21-32的氨基酸。實(shí)驗(yàn)中,標(biāo)準(zhǔn)品,質(zhì)控品或病人樣品與兩標(biāo)記抗體同時(shí)加入至包被有鏈霉親和素的包被孔內(nèi)溫育。
樣本中的降鈣素則會(huì)夾在兩抗體間,溫育結(jié)束后,洗去未結(jié)合成分,然后再加入底物液溫育,終止液加入終止反應(yīng),溶液顏色變?yōu)辄S色,樣本中降鈣素的量與顏色的強(qiáng)度成正比,以標(biāo)準(zhǔn)品的吸收值和濃度做標(biāo)準(zhǔn)曲線,則樣本濃度可直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得
試劑盒組成成分
●微孔板——12×8——即用型、包被有鏈親和霉素
●試劑1——1×7.0ml——即用型、含生物素標(biāo)記的降鈣素抗體
●試劑2——1×7.0ml——即用型、含HRP標(biāo)記的降鈣素抗體
●試劑3——1×10.0ml——即用型、含EDTA的配制液
●試劑A——1×30.0ml——20倍濃縮洗滌液
●試劑B——1×20.0ml——即用型、含TMB
●質(zhì)控品1+2——2×——凍干品、具體濃度見瓶身標(biāo)簽
●標(biāo)準(zhǔn)品A~F——6×——凍干品、具體濃度見瓶身標(biāo)簽
●終止液——1×20.0ml——即用型、含1N硫酸
降鈣素檢測(cè)所需材料(試劑盒內(nèi)不提供)
●移液器,50,100和150ul體積
●振蕩器
●8-通道移液器
●洗瓶,自動(dòng)或半自動(dòng)洗板機(jī)
●酶標(biāo)儀
●去離子水或蒸餾水
●吸水紙,槍頭,計(jì)時(shí)器
儲(chǔ)存條件
降鈣素檢測(cè)試劑盒應(yīng)當(dāng)在2~8℃運(yùn)輸和儲(chǔ)存,避免高溫和陽光直射。
檢測(cè)步驟
●標(biāo)準(zhǔn)品,質(zhì)控品和樣本吸取100ul至相應(yīng)的孔內(nèi),剩余的標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控用完后立即放回至-20℃凍存,不能儲(chǔ)存在自動(dòng)除霜凍存機(jī)內(nèi)
●每孔加100ul的試劑1
●每孔加50ul的試劑2
●蓋板,170±10rpm,室溫下(18-25℃)溫育4小時(shí)±30分鐘
●倒去孔內(nèi)溶液,用工作洗滌液洗板5次,如果用全自動(dòng)洗板機(jī),則每孔加350ul的洗液洗滌
●每孔加150ul的試劑B(TMB底物液)
●蓋板,170±10rpm,室溫下(18-25℃)溫育30±5分鐘
●每孔加100ul的終止液
●加入終止液10min內(nèi)在酶標(biāo)儀上讀數(shù),用250ul的去離子水校正450nm,同樣的校正405nm
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