β2微球蛋白ELISA檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
ELISA操作洗板過程常見問題及解答
1) 采用手工洗板, 孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。
解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后*在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
3)手工洗板,每次加液后浸泡30s左右,保證洗板的效果。
通用名稱:β2微球蛋白檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
英文名稱:β2-Microglobulin ELISA
產(chǎn)品貨號:EIA1789
產(chǎn)品規(guī)格:96T
檢測樣本:血清
公司品牌:德國DRG
儲存條件:2-8℃
檢測方法:ELISA方法
預期用途:用于人類血清中β2微球蛋白的體外定量檢測
參考價格:詢價
供應商家:深圳市科潤達生物工程有限公司
β2微球蛋白ELISA檢測試劑盒預期用途
β2微球蛋白檢測試劑盒用于人類血清中β2微球蛋白的體外定量檢測。
β2微球蛋白前言簡介
β2微球蛋白(β2-MG)由人體有核細胞和許多腫瘤細胞系表達。人類β2微球蛋白是一種低分子量蛋白質(zhì)(MW11600),由99個氨基酸組成的多肽單鏈。它是與人類白細胞抗原HLA-A,-B,-C主要組織相容性復合體抗原的輕鏈相同。在結構和氨基酸序列上,與IgG的CH3區(qū)域相似,雖然抗原性有區(qū)別。
β2微球蛋白通過腎臟代謝。在通過腎小球過濾后,由近端腎小管細胞通過內(nèi)吞作用重吸收和分解。在正常個體的血清和尿液中β2微球蛋白的量很低。通常只有微量的β2微球蛋白通過尿液排泄,尿排泄量升高被解釋為腎小管功能障礙的證據(jù)。腎小管間質(zhì)性疾病和存在氨基糖苷類抗生素和抗炎藥物聯(lián)用時β2微球蛋白尿排泄量會顯著的增加。
β2微球蛋白在上泌尿道感染和結締組織病(如:類風濕性關節(jié)炎)以及休格林氏癥綜合癥的病人尿液里排泄量也會增加。在正常腎小球過濾率,血清中β2微球蛋白濃度升高提示β2微球蛋白的產(chǎn)生或釋放增強。在類風濕關節(jié)炎,系統(tǒng)性紅斑狼瘡,結節(jié)病和一些病毒性疾病包括巨細胞病毒,非A型和非B型肝炎和感染性單核細胞增多癥的患者中,β2-MG血清水平與疾病活動有關。
β2-MG ELISA提供了一種靈敏可靠的測定人血清中β2-微球蛋白的測定方法。該試劑盒的標準品范圍為0.625至10μg/ mL,將確定0.1μg/ mL的最小可檢測濃度。該實驗2小時內(nèi)可出結果。
β2微球蛋白檢測試劑盒檢測原理
β2-MG ELISA測試是基于固相酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)的原理。實驗系統(tǒng)利用單克隆抗β2微球蛋白抗體固相固定(微孔中)。羊抗β2微球蛋白抗體結合到酶(辣根過氧化物酶)標記物上。稀釋的測試樣本在37℃時先和固相抗體反應30分鐘。然后加入羊抗-β2-MG-HRPO結合物37℃反應30分鐘,使β2-MG分子夾在固相載體和酶標抗體之間。
洗板以去除未結合的酶標抗體,加入TMB溶液在室溫下溫育20分鐘,使溶液變?yōu)樗{色。加入終止液(1N HCL)停止顏色反應,顏色變?yōu)辄S色。
試驗樣本β2-MG濃度和顏色強度成正比,吸光值在450nm處測量。
β2微球蛋白檢測試劑盒組成成分
●抗體包被板,96(孔),微孔中包被了鼠單克隆抗β2-MG抗體。
●酶聯(lián)物,22ml,含辣根過氧化物酶標記的羊抗β2-MG抗體。
●標準品,6瓶,凍干粉,101倍預稀釋后,含β2-MG抗體的濃度分別為:0,0.625,1.25,2.5,5,10ug/ml。
●樣本稀釋液,100ml,2% BSA緩沖液,含有防腐劑。
●TMB底物液,11ml,含穩(wěn)定的3,3,,5,5,,-四甲基聯(lián)本胺(TMB)緩沖液。
●終止液(1N HCL),11ml,含稀鹽酸。
β2微球蛋白檢測試劑盒儲存條件
●未開封試劑盒在2~8℃儲存至有效期,有效期參考包裝標簽。
●已開封試劑在2~8℃儲存恰當可穩(wěn)定至有效期。
●保持微孔板在含有干燥劑的密封袋里,以減少暴露于潮濕的空氣中。
β2微球蛋白檢測試劑盒檢測步驟
●將所需數(shù)量的包被孔固定到板架上。
●將20ul的標準品、稀釋樣本和稀釋質(zhì)控加到相應的孔中。
●每孔加入200ul樣本稀釋液*的混勻30秒。*混勻非常重要。
●37℃溫育30分鐘。
●倒出孔內(nèi)混合物并用去離子水或蒸餾水洗板5次(不能用自來水)。并在吸水紙上拍干。
●每孔加200ul酶聯(lián)物,輕輕的混勻10秒。
●37℃溫育30分鐘。
●重復步驟5.
●每孔加入100ul TMB底物液,輕輕混勻10秒。
●室溫避光溫育20分鐘。
●通過每孔加入100ul終止液終止反應。
●輕輕混勻10秒,這步非常重要確保所有的藍色*的變成黃色。
●15分鐘內(nèi)用酶標儀(450nm)讀數(shù)。
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