嗜鉻蛋白A+ELISA檢測(cè)試劑盒(Anti-CRPELISAKit)是一種用于檢測(cè)血清或血漿中嗜鉻蛋白A(CRP)水平的試劑盒。以下是其常見(jiàn)的檢測(cè)方法及步驟:
樣品準(zhǔn)備:將待測(cè)樣品(如血清或血漿)離心,將上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中,并在冰箱中存儲(chǔ)或立即使用。
檢測(cè)試劑盒準(zhǔn)備:取出所需數(shù)量的檢測(cè)試劑盒和標(biāo)準(zhǔn)品,使其回溫至室溫。
標(biāo)準(zhǔn)曲線制備:按照試劑盒說(shuō)明書(shū)中提供的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋倍數(shù),依次將標(biāo)準(zhǔn)品和相應(yīng)稀釋液混合。例如,可以將0ng/mL、3ng/mL、10ng/mL、30ng/mL等多個(gè)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品制成不同體積。
試劑配置:根據(jù)試劑盒說(shuō)明書(shū)提供的配方計(jì)算所需量,并按照指示操作進(jìn)行溶解和混合。一般包括工作緩沖液、底物溶液、洗滌緩沖液等。
酶聯(lián)免疫吸附過(guò)程:a)將稀釋好的標(biāo)準(zhǔn)品和樣品分別加入已標(biāo)記的酶聯(lián)試劑盒孔板中。b)蓋上孔板膜,輕輕搖晃或振蕩孔板,使液體充分混合。c)將孔板放置在恒溫箱中進(jìn)行孵育,一般為1小時(shí)。
洗滌:將洗滌緩沖液加入各個(gè)孔中,并用洗滌器將溶液抽出。重復(fù)此步驟3-5次以去除非特異性吸附物。
底物反應(yīng):加入底物溶液到每個(gè)孔中,并在室溫下避光培養(yǎng)15-30分鐘。
反應(yīng)終止:加入停止溶液到每個(gè)孔中,停止底物反應(yīng)。
測(cè)定吸光度:使用ELISA讀數(shù)儀測(cè)量每個(gè)孔的吸收值(波長(zhǎng)通常為450nm)。
數(shù)據(jù)處理:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中CRP的濃度值,并根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理和數(shù)據(jù)解讀。
請(qǐng)注意,在執(zhí)行以上步驟時(shí),請(qǐng)務(wù)必嚴(yán)格遵循檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)提供的操作指南和安全注意事項(xiàng)。此外,不同廠家生產(chǎn)的試劑盒可能會(huì)有細(xì)微差異,請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行操作。