檢測(cè)步驟:
每次實(shí)驗(yàn)都應(yīng)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線
1、將實(shí)驗(yàn)所需的板條固定于板架上
2、每孔加100ul的分析緩沖液
3、加20ul的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣本于相應(yīng)的微孔內(nèi)
4、每孔加入50ul的酶復(fù)合物,充分混勻10秒鐘
5、室溫下,溫育60分鐘(300~700rpm)
6、棄去孔內(nèi)反應(yīng)液,每孔加300ul的洗滌液洗板4次(手動(dòng))或400ul洗板3次(洗板機(jī))
7、每孔加100ul的酶聯(lián)物
8、室溫下30分鐘(無(wú)需振搖)
9、重復(fù)步驟6
10、每孔加100ul的底物液
11、室溫下溫育20分鐘
12、每孔加100ul的終止液
13、加入終止液10分鐘內(nèi),在酶標(biāo)儀450±10nm處檢測(cè)吸收值